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假單胞菌Pseudomonadaceae是無核細菌，是直或稍彎的革蘭氏陰性桿菌。以極生鞭毛運動，不形成芽孢，化能有機營養(yǎng)，嚴格好氧，呼吸代謝，從不發(fā)酵。此屬有29種，其中至少有3種對動物或人類致病。

其中，銅綠假單胞菌Pseudomonas aeruginosa是一種重要的水源性致病菌，廣泛存在于各類型水中，對消毒劑、干燥、紫外線等理化因素具有很強的抵抗力，可引起急性腸道炎、腦膜炎、敗血癥和皮膚癥狀等疾病。在最新發(fā)布的《食品安全國家標準包裝飲用水》(GB 19298-2014)中，新增了銅綠假單胞菌指標，保留了大腸菌群指標，不再保留菌落總數(shù)、霉菌和酵母計數(shù)、金黃色葡萄球菌、沙門氏菌及志賀氏菌指標。該國標中銅綠假單胞菌的檢驗方法按照GB/T 8538進行，GB/T 8538-2016 飲用天然礦泉水檢驗方法，培養(yǎng)基使用CN瓊脂，濾膜法，規(guī)定250ml水中不得檢出銅綠假單胞菌。

假單胞菌CN瓊脂 (Pseudomonas CN Agar)

用于分離銅綠假單胞菌的選擇性培養(yǎng)基，CM0559B加入甘油和CN添加劑后，符合GB/T 8538-2016的CN瓊脂的要求。

假單胞菌瓊脂基礎 CM0559：

配方表

*可根據標準需要自行調整配方

假單胞菌CN添加劑 SR0102E，或可稱CN補充成分：

SR0102E實物圖：

使用方法：

稱取24.2g的假單胞菌瓊脂基礎到500ml蒸餾水中，加入5ml甘油，煮沸至完全溶解，121℃滅菌15分鐘，冷卻至50℃，加入1瓶已經按照說明書溶解的SR0102E，混勻倒平板。

產品描述：

假單胞菌瓊脂基礎由King’s A Medium改良而來，添加的氯化鎂和硫酸鉀可以提高色素的產生。 

假單胞菌CN添加劑SR0102中的Cetrimide是一種選擇性試劑，給銅綠假單胞菌提供了很好的生長條件，色素的產生也強烈抑制了肺炎克雷伯菌，變形桿菌、普羅威登斯菌屬的生長。

假單胞菌CFC瓊脂 (Pseudomonas CFC Agar)

用于分離假單胞菌屬的選擇性培養(yǎng)基

假單胞菌CFC添加劑 SR0103E：

使用方法：

稱取24.2g的假單胞菌瓊脂基礎到500ml蒸餾水中，加入5ml甘油，煮沸至完全溶解，121℃滅菌15分鐘，冷卻至50℃，加入1瓶已經按照說明書溶解的SR0103E，混勻倒平板。

產品描述：

假單胞菌CFC添加劑SR0103E可以選擇性分離假單胞菌屬，把Cetrimide的含量降到10mg/L可以使產色素和不產色素的假單胞菌都生長，為了增加選擇性再加入了fucidin和cephaloridine，這種添加劑組合為冷藏加工食品中分離假單胞菌屬提供了更好地培養(yǎng)基。培養(yǎng)需要要25-30℃下培養(yǎng)48小時。

Oxoid假單胞菌CN瓊脂和CFC瓊脂的生長對比：

*洋蔥伯克霍爾德菌Burkholderia cepacia曾名為洋蔥假單胞菌Pseudomonas cepacia，同時在30℃培養(yǎng)18小時后觀察。

注意事項：

按要求制備的新鮮瓊脂培養(yǎng)基應在4小時內使用，且不能對其進行重熔或長期保存。如食品樣品在該培養(yǎng)基中生長時出現(xiàn)菌落群集現(xiàn)象，可將該樣品的培養(yǎng)基孵育條件調節(jié)為20℃孵育3-5天， CFC培養(yǎng)基更有利于冷凍食品樣品中多種假單胞菌的生長，在較低溫度下孵育，其可能獲得熒光假單胞菌、假單胞菌和銅綠假單胞菌，嗜水汽單胞菌也可能出現(xiàn)， 其帶有紅/棕色菌落，特別是在魚制品中。

溴化十六烷基三甲胺瓊脂(Peudomonas Cetrimide Agar)

用于從一系列樣本中選擇性分離和鑒定銅綠假單孢菌，配方為USP、EP 和AOAC 推薦，或簡稱CA培養(yǎng)基。

溴化十六烷基三甲胺瓊脂 CM0579B：

配方表：

 *可根據標準需要自行調整配方

R452802的配方和CM0579B一致。

使用方法：

稱取45.3g溴化十六烷基三甲胺瓊脂到500ml蒸餾水中，加入10ml甘油，煮沸至完全溶解，121℃滅菌15分鐘，冷卻至約50℃，倒入無菌平板。

產品描述：

溴化十六烷基三甲銨是一類具有廣泛的殺菌活性的季銨化合物，包括大量革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌。

銅綠假單胞菌可產生一系列的水溶性鐵螯合劑，如綠膿素與帶熒光的水溶性熒光素等，當水溶性綠膿素結合青藍色時，銅綠假單胞菌將顯現(xiàn)出明亮的綠色特性。此外，氯化鎂和硫酸鉀可提高菌對這些螯合劑的生產。

該培養(yǎng)基被美國藥典及歐洲藥典推薦用于微生物限度檢測，且其配方被A.O.A.C.推薦使用于化妝品中銅綠假單胞菌的分離。

儲存條件和保質期：

干粉培養(yǎng)基置于10-30℃條件下保存，在保質期之內使用。

制成培養(yǎng)基避光置于2-8℃條件下保存。

外觀：

干粉培養(yǎng)基：麥色干粉。

制成培養(yǎng)基：半透明，淡紅色凝膠。

銅綠假單胞菌培養(yǎng)圖片：